血紅素肽鐵果蔬飲料配方研發(fā)中的安全性評價

血紅素肽鐵是在真空低壓高頻脈沖電場（LHPEF）條件下，結合胰蛋白酶降解豬血紅蛋白（Hb），利用生物絮凝劑（MBF）絮凝回收，從而獲得食品級的具有生物活性的肽鐵物質(zhì)。血紅素肽鐵具有安全，易吸收，不導致食物載體品質(zhì)變化，穩(wěn)定性好，不防礙其它營養(yǎng)素的吸收等特點。其在果蔬飲料中可作為鐵強化劑。將血紅素肽鐵與西紅柿汁、紅棗汁、甘草汁等汁液按血紅素肽鐵10 mg/L，西紅柿200 ml/L，紅棗汁200 mL/L，甘草汁20 ml/L，檸檬酸0.2g/L，蜂蜜15 ml/L，黃原膠0.2 g/L，CMCNa 0.4 g/L，海藻酸鈉0.4g/L，胭脂紅適量，維生素C 2.0g/L配方，用純凈水調(diào)節(jié)至1L，混合調(diào)配、均質(zhì)、殺菌等工序加工成血紅素肽鐵果蔬飲料，在對其穩(wěn)定性研究的基礎上"，針血紅素肽鐵果蔬飲料的動物毒理性試驗進行研究。
方法
 Hemi Peptide-Fe制備方法 在新鮮豬血中添加2%抗凝（含1.5%檸檬酸三鈉、2.0%檸檬酸鈉），緩速攪拌均勻，然后，添加2倍體積的細胞分散液（含檸檬酸0.2%，檸檬酸三鈉0.15%，NaCl 0.5%，葡萄糖1.25%），在5000 rlmin離心15 min，棄去上清液，再添加1倍體積的細胞分散液，并在10 000 r/min離心20 min，收集沉淀物，即為紅細胞，在分離出的紅細胞中添加2倍體積的蒸餾水，置于超聲波處理器中破壁處理15 min，在真空度為0.08 MPa，1.88 V、200 kHz條件下，添加6000 U/mlL的胰蛋白酶，在37℃條件下反應4h，
95 ℃加熱15 min滅酶、10 000 r/min離心10 min，收集上清液，經(jīng)冷凍干燥而成。


汁液提取方法
甘草汁的提取方法 甘草經(jīng)粉碎后，按甘草質(zhì)量20倍添加蒸餾水，在100℃下煮沸30min，然后在85 ℃溫度條件下，保溫浸提2h，精濾，即得甘草汁。
 西紅柿汁的制取方法 新鮮西紅柿為原料，置于清水池內(nèi)浸泡30 min，再用流動清液清洗15 min，瀝干水分，放入多功能榨汁機內(nèi)榨汁，經(jīng)過清濾，即得西紅柿汁。
紅棗汁的提取方法2紅棗（干）用流動清水清洗3min，鼓風機鼓風吹干。放入遠紅外電烤箱內(nèi)，在110℃溫度條件下，焙烤15 min，取出，按紅棗質(zhì)量的20倍添加蒸餾水，在100℃沸騰條件下加熱30 min，使紅棗充分吸水膨脹軟化，并將每顆紅棗進行破碎，在80℃條件下保溫浸提6h，再經(jīng)粗濾和精濾，即制得紅棗汁。
血紅素肽鐵大鼠體內(nèi)表觀吸收率的測定方法 昆明種大鼠30只，平均體質(zhì)量為（120±10）g，隨機分為對照組和試驗組，每組15只。大鼠以去鐵基礎飼料喂養(yǎng)，自由進食，去離子水，喂養(yǎng)3d后，空腹12h，經(jīng)灌胃法給予對照組每只1.5 ml.血紅素肽鐵果蔬飲料，給予試驗組每只1.5 mL.血紅素肽鐵果蔬飲料，收集大鼠糞便，連續(xù)3d，處死大鼠取材，檢測相關指標。
小結
Hemi Peptide-Fe果蔬飲料在大鼠體內(nèi)Hemi Peptide-Fe表觀消化率達83.7%，LDso為7095mg/kg bw，95%置信區(qū)間為7968~6 222 mg/kg bw，急性毒性試驗和長期毒性中小鼠外觀及解剖特征圖與對照組相比無明顯變化。在7968 mg/kgbw高劑量的血紅素肽鐵果蔬飲料飼養(yǎng)雌、雄大鼠12周后，雄、雌性大鼠血清中的血清谷丙轉氨酶（ATL），谷草轉氨酶（ATS），血清尿素氮（BUN），血清白蛋白（ALB）、血紅蛋白（Hb）、紅細胞、總蛋白（TP）指標與生理鹽水對照組相比，無明顯差異。